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  • 电喷雾的产生液滴的方法有各种各样的应用吗?

    解释 ESI 电喷雾质谱仪 电喷雾生成 电喷雾 当对液体流施加高电压时,会产生液滴质谱负离子模式常见峰,这种技术称为电喷雾。例如: HPLC 流出物是液体流动。这种产生液滴的方法在 20 世纪初有各种应用。在电喷雾中,较大的液滴不断爆发成较小的液滴,最后,分析物解离成离子质谱负离子模式常见峰,变成气态。这里,纯电喷雾是指不使用雾化气体。在较高的 LC 流速下,鞘气用于帮助雾化过程。一些研究人员称这种方法为“气动辅助电喷雾”。实施例在该实施例中,单个肽被离子化以产生带电部分和不带电部分。分子中正电荷的数量通常与分子中碱基的数量有关。在质谱仪的正离子采集模式中,分析物在低 pH 值下被喷射,此时更可能形成正离子。在质谱的负离子采集模式中,高于分子等电点的负离子化有利于去质子化分子的产生。 ESI质谱法的基本原理是,在质谱仪本身可以利用其电场影响分子之前,分子必须能够带电。在下一节中,我们将解释为什么分子基团会出现在质谱分析中。注意:大多数由胰蛋白酶消化产生的肽都有两个潜在的质子化位点:氨基和碱液。质谱流动相的选择1)甲醇vs甲醇:优点:便宜,相同保留因子要求甲醇比例大,有机相浓度大有利于离子的优点:洗脱能力强(窄色谱峰)和低背压。

    质谱负离子模式常见峰_质谱碎片离子峰_负离子源 质谱

    缺点:价格较高。 2)有机相比例:一般有机相比例过低不利于原子化,过高不利于电离(且背景高)。建议使用约 40% 的有机相比。 3)梯度与等度梯度洗脱有利于检测未知样品,但耗时较长且信号稳定性较差。等梯度洗脱常用于保留时间较短的2-3种化合物的检测,所需时间短(2-3min),信号稳定。防止流动相过滤:所有流动相(水相、有机相、盐溶液等)必须用0.45um滤膜过滤;仪器不使用时,溶剂过滤器必须从水相或缓冲溶液中取出,从相中取出并浸泡在有机溶剂中,否则会导致霉菌和微生物的生长,造成溶剂过滤头堵塞吸滤头材质:不锈钢烧结、陶瓷、玻璃、聚四氟乙烯等故障:堵塞、流路不良(水相滤头易产生) 性能:管道内不断产生气泡,易造成流量不准确、压力波动严重 原因:水中细菌、流动相颗粒、空气中灰尘等 措施:用5%稀硝酸,超声波清洗,然后用蒸馏水清洗,最好每月一次(玻璃材料不能超声波处理)。将甲酸钠或乙酸钠添加到 LC-MS 的流动相系统中。因为无论使用 ESI 离子源还是 APCI 离子源,这些盐类都无法蒸发,结果很可能会堵塞离子源后面的加热毛细管,这是一个严重的问题。

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    我不知道AB安捷伦的质谱仪是如何抵抗不挥发盐的,但是以我们实验室的几台Finnigan质谱仪为例,无论是离子阱质谱仪,三重四极杆质谱仪和非- 挥发性盐可以添加到流动相系统中。如果绝对需要在流动相中添加缓冲液来调整峰形,我使用的唯一缓冲液是挥发性醋酸铵,浓度也严格控制在 10 mM 以下。即便如此,晚上做完实验后打开仪器的离子源时,仍然发现离子源中有一层白色薄膜。总之,对于 LC-MS,尽量不要使用缓冲盐。如果制备的药物对正离子反应良好,一般可以采用甲醇-水-甲酸体系或乙腈-水-甲酸体系;也可以使用水氨系统。根据我的经验,M+Na 峰离子确实不稳定,通过对 M+Na 峰进行二次全扫描质谱分析,几乎不可能得到稳定的二次碎片离子。 M+Na 峰和 M+NH4 峰的情况类似。我对大约 30 种药物的体内样品进行了 LC-MS-MS 定量分析,其中大约 10% 的药物有 M+Na M+NH4 峰,我从未用于定量离子。我觉得很难做好。

    我咨询了一些专家,包括我的老板,关于药物产生的M+Na M+NH4峰,他们的观点是药物产生M+Na M+NH4峰,这是由药物本身的性质,主要与药物的碱度有关。一般碱性较弱的药物容易产生M+Na峰或M+NH4。据我所知,乙酸钠是一种不挥发的酰胺类药物,正负离子都会有质谱响应,建议你在有负离子的流动相中加入少许氨水。比例为 0.1-0.5% 的 5% 氨水。不要使用太高,否则会浪费色谱柱。然而,正离子通常更好,至少对于 Finnigan 质谱而言。不知道大家有没有试过在离子源中加一点CID电压,有时可能会得到意想不到的效果电子没有空轨道,所以O、S、N特别容易捕获Na离子形成带电但当样品中存在多个 O、S 和 N 时,形成 +Na 峰的概率增加,而 +H 峰的比例逐渐降低。甚至消失;在液体质量分析中,由于基质中含有钠、钾、铵等,可以添加到药物分子中,也可以不添加到药物分子中而占据液滴表面,从而抑制分析物离子,这会导致其信号的大幅波动;因此,不推荐使用这种添加剂监测离子。由南安普顿大学John Langley博士研究(原文:~msweb/如果有些峰不能一直洗掉,不妨找一下列表中是否有Contamination Peaks PositiveIon ES

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